■概要

国立大学法人島根大学　医学部　吉山教授に委託した実験により、消臭除菌水（中性：pH約7）によって新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）が不活性化されることが確認されました。

・消臭除菌水，中性：pH約7,有効塩素濃度80ppm，1分の処理で以上不活性化した。（混合比；ウイルス液：次亜塩素酸水＝1：9）

■被験物質及び試験材料

【被験物質】

消臭除菌水

滅菌水（対照）

【ウイルス】

SARS-CoV-2

事前にDMEMで調製した冷凍保管ウイルス溶液（血清含まず）を使用

【細胞】

VeroE6/TMPRSS2

■被験物質とウイルスの反応条件

被験物質：ウイルス＝９：１（容量比）

室温20秒間、60秒間反応させた

※血清非存在下

■試験方法

１．被験物質とウイルス溶液を混合し、所定の反応を行った。

２．細胞毒性確認用に被験物質とEMEMを混合し、所定の反応を行った。

３．本反応液50μlを450μlのEMEMと混合した。

４．EMEMで10倍希釈を繰り返し、8段階希釈系を作成した。

５．細胞毒性確認用として、4段階希釈系を作成した。

６．細胞に各希釈液100μlを加え、37 ℃, 5 % CO₂下で1時間感染処理を行った。

７．ウイルス感染後、20 % FCS含有EMEMを50μl加え、CO₂インキュベーター内で2日間培養した。

８．経日的に顕微鏡下で細胞変性効果(cytopathic effect; CPE)を確認した。

９．細胞がwellからはがれたことを確認後、100μlイソプロパノールを加え、100μl固定液（エタノール：酢酸＝5：1）液を加え、一晩静置した。

１０．固定液を捨て、染色液（0.5 %アミドブラック inエタノール：酢酸：水＝45：10：45）を各wellに30μl分注し、well全体に行き渡らせ、1分程度おいて流水で濯ぎ、ウイルス感染の有無を目視で判定した。

50%感染価（TCID₅₀/ml）は、Behrens−Karber法で算出した。

■結果

消臭除菌水，中性：pH約7，有効塩素濃度80ppm、60秒の反応で感染価は3桁減少した。（99.9％以上不活性化）

対照物質（滅菌水）と同様に被験物質の細胞毒性は確認されなかった。